1) CPC chromatograms

Fig. 1. CPC chromatogram of the n-butanol fraction (i) (1 g) of the fruits of F. suspensa. Fractions 11-16 were combined, dried and weighed.

Fig. 2. CPC chromatogram of the n-butanol fraction (ii) (3 g) of the fruits of F. suspensa. Fractions 12-18 were combined, dried and weighed.

Fig. 3. CPC chromatogram of the n-butanol fraction (iii) (2.85g) of the fruits of F. suspensa. Fractions 13-21 were combined, dried and weighed.

Fig.1 ~ 3은 각각 1g, 3g, 2.85g injection 하여 정제한 결과이며 재현성 있는 결과로(target compound의 분획구간이 거의 같게 분리되었음을 볼 수 있다.) HPLC로는 분리하기 어려웠던 물질을 대량으로 분리해 낼 수 있었다.

2) ¹H-NMR spectra of the n-BuOH fraction and forsythiaside A

Fig. 4. Comparison of ¹H-NMR spectra of the n-BuOH fraction and the isolated forsythiaside A. ^* Denotes that the peaks from the residual n-BuOH in the fraction.

Fig.4 는 CPC로 분리한 분획을 NMR로 분석한 결과이며 n-BuOH 잔기를 제외하면 거의 일치하는 peak을 보여준다.

3) HPLC analysis of the fraction 13 obtained from the 1^st run (the purest peak from the 1^st run)

CPC 분획을 HPLC 조건에서 분리하였을 때 원하는 target compound인 forsythiaside A 만이 분리된 것을 볼 수 있었다.

본 연구에서는 CPC system을 이용하여 HPLC로는 정제가 어려웠던 천연물 분리 및 정제 기법을 제시하였다. HPLC 분석으로는 극성이 강한 천연물에 대해 분석이 어려우나 CPC 분석으로는 재현성 있는 정제분석이 가능하다는 것을 볼 수 있었다. 또한 컬럼이 필요없으며 용매소모량이 적어 매우 경제적인 분석 방법이라는 것을 알 수 있었다. CPC분석은 더욱 다양한 천연물 혹은 극성이 강한 화합물의 분석이나 Scale-up을 통해 수율을 높이고 싶거나 단일물질을 확인하고자 할 때에 매우 유용한 방법이라 할 수 있다.