Forsythia suspensa은 잘 알려진 한약재로 중국, 한국 및 일본에 널리 분포되어 있다. Forsythia suspensa의 말린 열매는 바이러스와 세균 감염에 의해 유발되는 질병 특히 임질, 과민성 염증, 열병 및 궤양 및 급성 호흡 기관의 질병을 치료하기 위해 오래전부터 중국과 일본에서 사용되어 왔다. Phenethanol glycosides 중 forsythoside A-1, suspensaside A, suspensaside B 등이Forsythia suspensa의 주요 생체 활성 성분이다. 이들 중 forsythoside A는 중국 약전에 의해 지정된 Forsythia suspensa의 품질 관리 가이드 라인 성분이다. 그러므로 forsythoside A를 많은 양으로 순수하게 얻어내는 것이 치료제 연구에 필수적이다.

CPC system work flow

CPC (Centrifugal Partition Chromatography)는 비가역적 흡착, 높은 시료 회수율, 저렴한 비용, 높은 시료 주입 용량, Analytical 단계에서 Preparative 단계로의 확장 가능성까지 많은 장점을 가지고 있다. CPC는 최근 몇 년 동안 HPLC로 분리할 수 없었던 천연물의 분리 및 정제에 대한 효율적인 대체 방법으로 떠오르고 있다. 또한 기존 HPLC 와는 달리 컬럼이 필요없으며 용매의 소모량도 상대적으로 적고 분석시간 또한 약 35% 가량 줄일 수 있어 매우 경제적이고 효율적인 분석 방법이라 할 수 있다.
본 실험에서는 Forsythia suspensa에서 고순도의 forsythoside A 정제를 위한 CPC 실험 결과를 보고하고자 한다. forsythoside A와 정성 분석은 MS, UV 및 NMR로 수행 하였다.

1) Centrifugal Partition Chromatography conditions
	본 실험에서는 CPC250 (Gilson S.A.S)과 PLC2250 (Gilson S.A.S)을 연결하여 분석을 수행하였다.
	분액 깔대기로 ethyl acetate-n-butanol-methanol-water (4:0.5:0.5:5, v/v)의 혼합물을 섞고 실온에서 분리하였다.
	Upper Phase를 고정상으로 사용하고 Lower Phase를 이동상으로 사용하였다.
	컬럼(250mL)을 고정상으로 flow rate 30mL/min로 채우고 회전속도 500 rpm으로 유지하였다.
	이동상을 8mL/min의 유속으로 컬럼안으로 펌핑하고 이 때 회전속도 1800 rpm으로 설정하였다.
	F. suspensa (1회 1g, 2회 3g, 3회 2.85g) 샘플을 4mL의 고정상 및 이동상 용액 혼합물에 용해시키고 PTFE 필터 (소수성, 직경 13mm, pore size 0.45㎛)로 여과하였다.
	샘플은 파장 254nm, 280nm 및 330nm에서 모니터링하고, 분획을 330nm 파장 흡수율에 따라 수집 하였다.
2) Analysis of fractions from CPC
HPLC conditions
	YMC- Pack ODS-AQ column (250 mm x 10 mm, 5 μm) and a guard column을 이용하여 CPC 분획을 20 μL injection 하여 254nm, 280nm, 330nm 에서 분석하였다.
Gradient conditions
	H2O with 0.1 % formic acid (A) and methanol (B) was used with a gradient solvent system (0-10 min: 25% B - 35%B ; 10-35 min: 35% B; 35-55 min: 35% B-70% B; 55- 60 min: 70% B-25 % B; 60-70 min: