| 1. |
BSA를 Deinoized water에 녹인 후 단계 희석하여 샘플을 준비한다. |
| 2. |
Nano Stick에 Reference (D.I Water)를 점적 후 S-3100 UV-Vis spectrophotometer로 Blank를 측정한다. |
| 3. |
Reference를 닦아낸 후 BSA 시료를 점적 후 흡광도를 측정한다. |
| 4. |
각 농도별로 2, 3번의 과정을 5회씩 반복한다. |
| 5. |
0.5 mm pathlength Nano Stick과 0.2 mm pathlength Nano Stick으로 2~4 과정을 거쳐 흡광도를 측정하여 각각의 정량 가능한 농도 범위를 확인한다. |
1. 0.5 mm pathlength Nano Stick
0.5 mm pathlength Nano Stick으로 2.5 ul의 BSA 시료를 점적하여 측정하였으며 Figure 3에 검정곡선 결과를 보였다.
검정 곡선은 80 mg/ml의 BSA를 단계 희석하여 희석 배수에 대해 측정된 BSA 농도 값으로 나타내었다.
Figure 3. 0.5 mm Nano Stick 사용 시 검량 곡선
2. 0.2 mm pathlength Nano Stick
0.2 mm pathlength Nano Stick으로 1.5 ul의 BSA 시료를 점적하여 측정하였으며 Figure 4에 검정곡선 결과를 보였다.
검정 곡선은 100 mg/ml의 BSA를 단계 희석하여 희석 배수에 대해 측정된 BSA 농도 값으로 나타내었다.
Figure 4. 0.2 mm Nano Stick 사용 시 검량 곡선
Table. 1에는 각 pathlength 별 Nano Stick을 사용 시 측정한 BSA 농도 범위와 검량곡선의 R2값을 나타내었다.
Table. 1. Pathlength별 R2값과 측정 농도 범위
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Pathlength |
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0.5 mm |
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0.2 mm |
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R2 |
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0.9994 |
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0.9998 |
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측정 농도 범위 |
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0.1 ~ 80 mg/ml |
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0.5 ~100 mg/ml |
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㈜신코의 Nano Stick과 S-3100 PDA Spectrophoto-
meter를 이용하여 BSA의 정량 직선성을 확인하였다. 0.5 mm pathlength와 0.2 mm pathlength Nano Stick 모두 R2 값이 1에 가까운 직선성을 나타냄을 검량 곡선을 통해 확인하였다. ㈜신코의 Nano Stick을 이용하여 소량의 시료로 BSA 농도 0.1 mg/ml에서 고농도의 100 mg/ml까지 희석 없이 측정할 수 있었다.
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