| 1) |
Normalised Collision Energy(NCE)¸¦ »ç¿ëÇÑ HCD´Â iTRAQ Reporter ÀÌ¿ÂÀ» Æ÷ÇÔÇÑ MS/MS µ¥ÀÌÅÍ¿¡¼ 3ppm RMSÀÇ ¸Å¿ì Á¤È®ÇÑ Áú·®°ªÀ» ³ªÅ¸³Â´Ù. ÀÌ´Â µ¿½Ã¿¡ ´Ü¹éÁú ±Ô¸í°ú Á¤·®À» Çϱâ À§ÇÑ °æ¿ì, Peptide¿¡ iTRAQÀ» TaggingÇϰí HCD °á°ú¸¦ ÅëÇØ ¿¬±¸ ÇÒ ¼ö ÀÖÀ½À» Á¦½ÃÇÑ´Ù. |
| 2) |
Ion Trap ModeÀÇ Data Dependent MS/MS°ú µ¿½Ã¿¡ °íÁ¤È®µµÀÇ Áú·® °üÃøÀÌ °¡´ÉÇÑ OrbitrapÀÇ HCD Data Dependent MS/MS¸¦ Parallel ¸ðµå·Î µ¥ÀÌÅ͸¦ ÃøÁ¤ÇÑ °á°ú, Protein Sequence Coverage°¡ ÈÙ¾À Áõ°¡ÇÏ¿´´Ù. |
| 3) |
°íºÐÇØ´É°ú ³·Àº ÈÇÐÀû NoiseÀÇ ¼±ÃµÀûÀÎ ±â¼úÀ» °¡Áø Orbitrap µ¥ÀÌÅÍ´Â iTRAQÀ» ÀÌ¿ëÇÑ Á¤·®ºÐ¼®¿¡ ÀÖ¾î ÇʼöÀûÀÌ´Ù. Àú ºÐÀÚ·® ¿µ¿ª¿¡¼ µ¿ÁßÇÙÀÇ °£¼· ÀÌ¿ÂÀ» iTRAQ Reporter IonÀ¸·ÎºÎÅÍ ºÐ¸®Çϱâ À§Çؼ´Â 11000 FWHMÀÇ ºÐÇØ´ÉÀÌ ¿ä±¸µÈ´Ù. ÀÌ´Â Á¤·®ºÐ¼®¿¡ ÀÖ¾î Á¤È®µµ¿Í Á¤¹Ðµµ¸¦ ¸ðµÎ¸¦ °³¼±½ÃŲ °ÍÀÌ´Ù. Figure 6°ú °°ÀÌ ºÐÇØ´ÉÀ» 16,000À¸·Î »ç¿ëÇϸé È¥ÇÕ¹°À» ºÐ¼®ÇÒ ¶§ ¸íÈ®ÇÑ °á°ú¸¦ ȹµæÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù. ÀÌ´Â ÆíÀǸ¦ °í·ÁÇÏ¿´À» ¶§, peptide È¥ÇÕ¹°¿¡¼ ³·Àº ³óµµÀÇ Peptide Á¤·® ºÐ¼®À» À§ÇØ ½Ç·Î ÇʼöÀÎ °ÍÀ¸·Î Ãß·ÐÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù. |
| 4) |
iTRAQ ºñÀÇ Á¤È®µµ´Â »ó´ë¿ÀÂ÷°¡ Æò±ÕÀûÀ¸·Î ´Ü¹éÁú ·¹º§¿¡¼ 4%, Peptide ·¹º§¿¡¼ 9%·Î ³ªÅ¸³µ´Ù. |
| 5) |
iTRAQ ºñÀÇ »ó´ëÀûÀÎ °¡º¯À²Àº Æò±ÕÀûÀ¸·Î ´Ü¹éÁú ·¹º§¿¡¼ 2.4%, Peptide ·¹º§¿¡¼ 10%·Î ³ªÅ¸³µ´Ù. |
| 6) |
LTQ OrbitrapÀº Á¤¼º ºÐ¼®°ú iTRAQÀ» ÀÌ¿ëÇÑ ´Ü¹éÁú Á¤·®ÀÖ¾î µÑ´Ù QqTOFº¸´Ù ÁÁÀº °á°ú¸¦ º¸¿´´Ù. Protein Sequence Coverage¿Í ´Ü¹éÁú ·¹º§ÀÇ Á¤·®ÀûÀÎ Á¤È®µµ ±×¸®°í ¶ÇÇÑ Peptide ·¹º§ÀÇ Á¤¹Ðµµ¿Í Á¤È®µµ¿¡ ´ëÇØ¼µµ ¿ùµîÈ÷ ÁÁÀº °á°ú¸¦ ¾ò¾ú´Ù. ƯÈ÷, QqTOF Áú·®ºÐ¼®±â¸¦ ÀÌ¿ëÇÒ °æ¿ì, ³ôÀº ÈÇÐÀû ÀâÀ½°ú ³·Àº ºÐÇØ´ÉÀ¸·Î ÀÎÇØ iTRAQ Reporter·ÎºÎÅÍ µ¿ÁßÇÙ °£¼· ÀÌ¿ÂÀ» ºÐ¸®Çϱ⠾î·Á¿ö Peptide ·¹º§¿¡¼ÀÇ ´Ü¹éÁúÀ» Á¤·®ÇÏ´Â °ÍÀÌ LTQ Orbitrap¿¡ ºñÇØ ÇöÀúÈ÷ ¼º´ÉÀÌ ¶³¾îÁö´Â °ÍÀ¸·Î °£ÁֵǴ ¹ÙÀÌ´Ù. |