대사체학과 같은 생물학적인 시료에서 대사물질들의 포괄적이고 정량적인 분석이 새로운 연구분야로 떠오르고 있다. 많은 분석물질은 화학적인 유도체와 양극성을 가지고 있다. 게다가 대사산물은 집중 연구 범위 내 특별한 시료에서 생성된다. 따라서, 포괄적인 대사체학 연구는 LC-MS/MS를 이용하여 이러한 화학적인 과제를 풀어 갈 수 있다.
차 종류에는 비타민, 아미노산, 폴리페놀과 같은 유사한 구조의 성분과 곁사슬의 위치가 다른 성분 등을 포함하고 있다. 고분해능 크로마토그래피를 이용하는 것은 복잡한 혼합물을 분리하는데 필수적인 요소가 된다. 게다가 고정확도의 full scan과 MSn 데이터는 명확한 구조적인 정보를 얻는데 유용한 근거자료가 된다.
여기서 우리는 미지의 대사체학 분석 시, 데이터를 받으면서 대사산물을 바로 확인하는 과정을 중요시 한다. 본 연구는 녹차와 홍차의 Polyphenolic catechin(flavan-3-ol) 유도체와 Theaflavin 성분의 구조적인 특성과 차이점을 밝히는데 의의를 둔다.

녹차와 홍차는 어떠한 전처리 과정 없이 용액상태로 추출하였다. 각 샘플은 네번씩 분석하였다.

크로마토그래픽 분리는 ThermoFisher Scientific Accela UHPLC 시스템을 사용하여 실행하였다. LC 분석 조건은 아래와 같다.
Column: Hypersil GOLD, 100x2.1mm, 1.9um particle size (Thermo Fisher Scientific, Bellefonte, PA)
Mobile phase: (A) Water with 0.1% formic acid, (B) Acetonitrile with 0.1% formic acid
Flow rate: 500ul/min
Injection volume: 10ul
Gradient: Linear gradient of 100%-1% A over 20minutes

질량분석은 LTQ-Orbitrap XL mass spectrometer (Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA)를 이용하였다. 질량 분석기의 분석 조건은 아래와 같다.
Positive electrospray ion source voltage: 5kV
LC를 거쳐 분리된 시료의 분자량을 확인하기 위한 full scan을 할 때의 분해능은 30,000으로 하고, Data Dependent MS/MS를 통해 분리된 시료 가운데 intensity가 가장 큰 것을 우선으로 MS/MS를 할 때의 분해능은 7500으로 이행하였다.